时间: 2025-08-09 16:07:19     来源: worldvault.krnewsserving.com     作者: 旅游故事

油茶籽油，精炼又名山茶油、对油的影茶油，茶籽其脂肪酸组成与“液体黄金”橄榄油尤为相似，油萜其还富含角鲨烯、类化甾醇等三萜类化合物。合物含量三萜类化合物对人体的精炼营养保健起着重要的作用，如具有降低血清胆固醇水平，对油的影预防心脏病及抗炎、茶籽抗癌等作用。油萜目前，类化油茶籽油三萜类化合物研究大多集中在菜油甾醇、合物含量谷甾醇、精炼豆甾醇等几种常见甾醇，对油的影而对其他三萜类化合物并未深入研究。茶籽为关注油茶籽油精炼加工过程中三萜类化合物含量变化，本研究以正己烷为洗脱剂，采用中性氧化铝柱层析提取分离不同精炼工序油茶籽油中三萜类化合物，并利用 GC － MS 测定不同精炼工序的油茶籽油中三萜类化合物含量，研究精炼过程对三萜类化合物含量的影响，对全面认识油茶籽油的营养具有重要意义，并为后续开展油茶籽油适度精炼提供数据支持。

1 材料与方法

1． 1 实验材料

1． 1． 1 原料与试剂

油茶籽浸出毛油及其脱酸油、脱色油、脱臭油、成品油，各 6 批次，由江西齐云山油茶科技有限公司提供。角鲨烯、胆甾烷醇、菜籽甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、 β － 谷甾醇、β － 香树脂醇、羽扇豆醇、环阿屯醇、熊果醇、桦木醇、无水嘧啶，美国 Sigma 公司; 羊毛甾醇，美 国 Avanti 公司; 中性氧化铝( 薄层用，FCP200 ～ 300 目) ; 氢氧化钾、无水乙醇，分析纯; 正己烷，色谱纯，美 国 Honeywell 公司; 0．22 μm 滤膜，日本 Shimadzu 公 司; 99∶ 1 双三甲基硅基三氟乙酰胺 － 三甲基氯硅烷( 99∶ 1 BSTFA －TMCS) ，美国 TCI 公司。 

1． 1． 2 仪器与设备

7890B + 7000D 气相色谱 － 三重四级杆串接质谱联用仪，美国安捷伦公司; QUINTIX124 － 1CN 电
子分析天平( 精度≤0． 1 mg) ，德国赛多利斯公司; HH － 6 电热恒温水浴锅，上海博讯实业有限公司; Vortex Wizard 涡旋仪，意大利 VELP 公司; N － EVAP氮吹仪，美国 Organomation 公司; Ｒ － 100 旋转蒸发器，瑞士 Buchi 公司; 层析柱、冷凝回流管、圆底烧瓶、玻璃试管，四川蜀玻有限公司。 

1． 2 实验方法

1． 2． 1 标准曲线的绘制

用丙酮分别配制 1 mg /mL 角鲨烯、菜籽甾醇、菜油甾醇、胆甾烷醇、豆甾醇、β － 谷甾醇、β － 香树
脂醇、环阿屯醇、羽扇豆醇、熊果醇、羊毛甾醇、桦木醇母液。样品测定时，根据油茶籽油中实际三萜类
化合物浓度，在各三萜类化合物线性范围内将母液配制成分别含有 0． 2、0． 5、1、2、5、10 μg /mL 豆甾醇、羽扇豆醇、桦木醇、熊果醇、菜籽甾醇、菜油甾醇，2、5、10、20、50、100 μg /mL 角 鲨 烯、β － 谷 甾醇、羊毛甾醇，10、25、50、100、250、500 μg /mL 环阿屯醇、β － 香树脂醇 6 个梯度的不同质量浓度混标，混 标 中 加 入 100 μL 内 标 ( 1 mg /mL 胆 甾 烷醇) 。氮 吹 后 加 入 100 μL 硅 烷 化 试 剂 ( 99 ∶ 1 BSTFA － TMCS 和等体积无水嘧啶) 衍生试剂，室温放置 15 min，加入 1 500 μL 正己烷稀释，过 0． 22 μm 有机滤膜，进气相色谱 － 质谱检测。以目标化合物质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线。 

1． 2． 2 GC － MS 条件

1． 2． 2． 1 GC 条件

HP － 5MS 色 谱 柱 ( 30 m × 0． 25 mm × 0． 25 μm) ; 载气为氦气，流速 0． 95 mL /min; 进样口温度320 ℃，进样量 1 μL，不分流进样; 柱升温程序为初始温度 180 ℃，保持 1 min，以 4 ℃ /min 升到 300 ℃，保持 25 min; 溶剂延迟时间 20 min。 1． 2． 2． 2 MS 条件电子轰击离子源，电子能量 70 eV，传输线温度300 ℃，离子 源 温 度 250 ℃，质 量 扫 描 范 围 ( m /z) 50 ～ 650。每种目标化合物定性、定量离子见表 1。

1． 2． 3 中性氧化铝柱的制备

参照 GB /T 25223—2010《动植物油脂 甾醇组成和甾醇总量的测定 气相色谱法》并稍作改进。在 20 mL 乙醇中加入 10 g 中性氧化铝混合，并将混合液倒入层析柱中，使氧化铝沉降并敲打至无缝隙，使
用前打开活塞使乙醇液面到达氧化铝顶层时关闭，备用。 

1． 2． 4 样品中三萜类化合物的提取及含量测定

准确称取每批次油茶籽油样品( 0． 50 ± 0． 01) g， 3 个重复，加入 100 μL 内标物( 1 mg /mL 胆甾烷醇) 和 2% 的氢氧化钾 － 乙醇溶液，混匀，75 ℃ 下水浴回流 1 h 后冷却至室温，取 5 mL 皂化液至中性氧化铝柱，先用 5 mL 乙醇洗涤不皂化物，后用 30 mL 正己烷洗脱并控制流速，收集洗脱液。洗脱液在 65 ℃ 旋转蒸发器蒸干后复溶于 5 mL 正己烷，转移到 15 mL玻璃离心小管中，氮吹后加入 100 μL 硅烷化试剂( 99∶ 1 BSTFA － TMCS 和等体积无水嘧啶) 衍生试剂，室温放置 15 min，加入 1 500 μL 正己烷稀释，过 0． 22 μm 有机滤膜，进样，按 1． 2． 2 条件进行 GC － MS 分析，峰面积带入标准曲线方程中计算各三萜类化合物的含量。

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